Isolierung und Charakterisierung eines Promotors des Copalyl-Diphosphat-Synthase-Gens

Das vorgestellte Material betrifft die Klonierung des Promotors und die In-silico-Identifizierung von cis-aktiven Elementen, die im Copalyl-Diphosphat-Synthase-Gen (CPS) von Salvia miltiorrhiza lokalisiert sind. Die Pflanze ist aufgrund ihrer bedeutenden biologischen Aktivität, die von Terpenoidverbindungen namens Tanshinone abhängt, medizinisch interessant. Da die Stoffwechselwege der Tanshinon-Biosynthese noch nicht vollständig aufgeklärt sind, haben wir uns entschlossen, den unbekannten Aspekt der Transkriptionsregulation von CPS, dem für die Tanshinon-Biosynthese entscheidenden Enzym, zu entschlüsseln. Wir haben zahlreiche cis-aktive Motive sowie homologe Transfaktoren identifiziert, die möglicherweise bei der Regulation des CPS-Gens von S. miltiorrhiza aktiv sind. Die Analyse der Transfaktor-Gene, die gemeinsam mit A. thaliana CPS exprimiert werden, und ihr Vergleich mit den Transfaktoren, die durch In-silico-Suchen des S. miltiorrhiza CPS-Promotors identifiziert wurden, ergab keine gemeinsamen Proteine. Um die Ergebnisse der In-silico-Suchen experimentell zu validieren, wurde der Einfluss von Auxin, Gibberellin, Salicylsäure und hoher Salzkonzentration auf die Promotoraktivität untersucht: Die gus-Genexpression wurde 0, 12, 24, 48, 72 und 96 Stunden nach der Hormonbehandlung oder während einer 96-stündigen Exposition gegenüber 100 mM NaCl gemessen.

Autorentext

Piotr Szymczyk, Doktor der Philosophie, Leiter der Abteilung für Pharmazeutische Biotechnologie, Fakultät für Pharmazie, Medizinische Universität ód (Polen). Doktorgrad verliehen von der Universität ód .